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摘要:
本研究旨在探索作为先天免疫相关分子的BCL10蛋白对山羊的免疫调控.实验采用RT-PCR、3'RACE和5'RACE克隆方法,以NCBI中山羊BCL 10预测基因序列为模板,克隆初生羔羊脾脏组织BCL10基因cDNA序列,并进行生物信息学分析;采用qRT-PCR技术检测羔羊BCL10基因各免疫相关组织转录表达谱;鉴定pEGFP-N1-BCL10重组质粒在细胞的真核表达效果.结果表明:克隆得到BCL10基因cDNA全长1023 bp,其中CDS为693 bp,编码230个氨基酸;生物信息学分析结果发现山羊BCL10蛋白是一种N端存在CARD结构域、非分泌、非膜结合的胞内蛋白,氨基酸序列与水牛、绵羊的亲缘关系最为接近;颌下腺中BCL10基因表达量显著高于肺脏、肝脏、脾脏、肾脏及血液(P<0.05),胸腺中BCL10基因表达量显著高于血液(P<0.05),血液表达最少;成功构建了BCL10基因完整CDS序列的pEGFP-N1-BCL10重组载体,并在HEK293T真核细胞正常表达.本研究首次克隆出羊BCL10基因cDNA全长序列,检测了基因表达分布情况,构建了重组载体,为进一步探索山羊BCL10基因功能及蛋白免疫机制提供理论基础.
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文献信息
篇名 山羊先天免疫基因BCL10克隆、组织表达及真核载体构建分析
来源期刊 中国畜牧杂志 学科 农学
关键词 山羊 BCL10基因 克隆 表达分析 真核转染
年,卷(期) 2018,(5) 所属期刊栏目 遗传育种
研究方向 页码范围 38-44
页数 7页 分类号 S827.2
字数 6353字 语种 中文
DOI 10.19556/j.0258-7033.2018-05-038
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山羊
BCL10基因
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真核转染
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