金黄色葡萄球菌噬菌体qdsa001内溶素的特性预测及克隆表达

• 作者: 吕晓倩 林洪 王静雪
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 噬菌体 生物信息分析 内溶素 克隆表达
• 年，卷（期）: 2018,（18）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 133-138
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4536字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201818021

摘要

为获得噬菌体qdsa001的内溶素,本实验首先利用多种在线软件对内溶素lys56(GenBank:ARQ95812.1)的理化性质、信号肽、跨膜域和结构域等特性进行分析,然后选择克隆表达法制备目的蛋白.将合成的目的基因插入原核表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET-30a-lys56,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,获得表达稳定的基因工程菌,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,利用镍琼脂糖亲和层析纯化表达产物.经在线软件预测结果显示,该蛋白分子质量为35.1 kDa,无信号肽和跨膜域,仅含有一个Ami 2结构域.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示重组蛋白表达成功,且以可溶性蛋白的形式存在于细胞破碎上清液,分子质量约35 kDa,与预期蛋白大小一致.重组蛋白最佳表达条件为:IPTG浓度0.5 mmol/L,20℃过夜诱导.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林洪	中国海洋大学食品科学与工程学院	211	2069	22.0	32.0
2	王静雪	中国海洋大学食品科学与工程学院	35	225	9.0	13.0
3	吕晓倩	中国海洋大学食品科学与工程学院	1	0	0.0	0.0