跨膜蛋白39A基因SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及评价

• 作者: 冯若飞 张海霞 李倩 李向茸 李琼毅 王兴陇 马忠仁 马瑞仙
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 跨膜蛋白39A SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR 特异性 灵敏性
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 生物系统工程
• 页码范围: 1958-1964
• 页数: 7页
• 分类号: S85|Q78
• 字数: 4490字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2018.11.20

摘要

为建立一种快速检测跨膜蛋白39A(TMEM39A)基因的方法,根据GenBank中登录的不同种属TMEM39A基因序列的保守区域,设计并合成1对荧光定量通用性引物,经过条件优化,建立了检测TMEM39A基因的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法.结果显示:标准品模板在3.937×108～3.937×103拷贝· μL贝· μL-1范围内呈良好的线性关系,R2可达0.999;该方法特异性较好,检测灵敏度可达3.937×102拷-1;组内和组间变异系数均小于1％,具有较高的重复性和稳定性;利用该方法能够检测出不同细胞中的TMEM39A含量,具有种属通用性.该研究方法的建立为临床上提供了一种TMEM39A的快速检测和定量分析技术.