两株H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白中和性单克隆抗体的制备及抗病毒活性研究

• 作者: 乔传玲 吴运谱 杨焕良 梁文花 许程志 贾云慧 陈化兰 陈艳
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 HA蛋白 单克隆抗体 中和活性
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1460-1466
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659
• 字数: 5230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.07.015

摘要

为了制备抗欧亚类禽型(Eurasian avian-like,EA)H1N1猪流感病毒(SIV)血凝素(HA)蛋白的单克隆抗体(MAb)并对其生物学活性进行检测,利用SIV A/swine/Henan/11/2005 (HN11)增殖、纯化的全病毒蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,采用间接ELISA和HI检测方法进行筛选.结果获得了两株能稳定分泌抗HA蛋白MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为2B6和4C7;两株MAbs的腹水ELISA和HI效价均分别高于1:107和5 log2;两株MAbs能够在IFA试验中与病毒HA蛋白发生反应,而在Western blot试验中不能检测到病毒HA蛋白;病毒中和试验结果显示这两株MAbs对EA H1N1 SIV具有病毒中和活性;MAbs的抗病毒活性又进一步通过小鼠的感染试验进行了评估,结果表明接种了MAbs的小鼠获得了有效抵抗同源及异源H1N1 SIV感染的保护效果.研究证实制备的两株MAbs具有较高的病毒中和活性和较强的抗病毒感染能力,可以将其进一步应用于抗EA H1N1 SIV的感染及开展病毒抗原性变异的分子基础研究.