苦瓜ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 康玉妹 张前荣 李大忠 李永平 林珲 汪伟裁 温庆放 薛珠政
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: 苦瓜 ISSR 分子标记 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 标记辅助育种
• 页码范围: 1184-1189
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.016.001184

摘要

为建立适合于苦瓜的ISSR反应体系,为后续苦瓜的遗传多样性分析和亲缘关系鉴定奠定基础,本研究以“609”苦瓜品种作为模板DNA,试验采用单因素试验设计对影响反应体系的DNA模板、引物、dNTP和Taq酶的含量进行优化,并对单因素结果进行L9(33)正交试验设计.研究结果表明,苦瓜ISSR:20 μL最佳反应体系为:2μL的10×Buffer(含Mg2+),30ng模板DNA,0.25 mmol/L的dNTP,0.5 μmol/L的引物,1.25 U的TaqDNA聚合酶.在此基础上,对优化引物的退火温度,确定最适宜的退火温度.验证优化的最佳反应体系,选用引物cw39132对48个苦瓜品种进行所确立扩增体系的验证,结果显示扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富,且特异性强和重复性好,表明本研究所确定的反应体系适用于苦瓜的ISSR分子标记.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛珠政	福建省农业科学院蔬菜研究中心	79	312	10.0	14.0
2	李永平	福建省农业科学院蔬菜研究中心	64	330	11.0	15.0
3	李大忠	福建省农业科学院蔬菜研究中心	52	260	8.0	14.0
4	温庆放	福建省农业科学院蔬菜研究中心	108	864	14.0	25.0
5	林珲	福建省农业科学院蔬菜研究中心	33	137	8.0	11.0
6	康玉妹	福建省农业科学院蔬菜研究中心	26	121	5.0	10.0
7	张前荣	福建省农业科学院蔬菜研究中心	15	7	1.0	2.0
8	汪伟裁	福建省农业科学院蔬菜研究中心	1	0	0.0	0.0