白芥ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 吴军 唐楠 唐道城
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: 白芥 分子标记 简单序列重复区间 体系验证
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 标记辅助育种
• 页码范围: 1214-1221
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.016.001214

摘要

本实验以产于四川、安徽、广东和青海的白芥农家品种为材料,采用单因素筛选和L16(45)正交设计相结合的方法,对白芥ISSR-PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶和模板DNA用量进行优化,建立最佳的白芥ISSR-PCR反应体系.结果表明:在20 μL的PCR反应体系中,Mg2+浓度2.0 mmol/L、dNTPs浓度0.5 mmol/L、TaqDNA聚合酶0.2 U、引物浓度0.4 μmol/L、模板DNA 60 ng为最佳用量.用4个白芥农家品种对建立的ISSR-PCR反应体系进行验证,表明该反应体系稳定性高、可重复性好,同时筛选出条带清晰、多态性较好的18条引物.该反应体系的建立为白芥ISSR标记开发、种质资源鉴定与筛选、遗传多样性分析和分子标记辅助育种等提供了帮助.