AEG-1肺归巢域与Flagellin融合基因的杆状病毒制备及鉴定

• 作者: 张喆 张惠中 王希 王琳 董轲 龙敏
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 生物学
• 关键词: 病毒样颗粒 AEG-1 肺归巢域 Flagellin
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1807-1812
• 页数: 6页
• 分类号: Q784
• 字数: 4377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2018.10.047

摘要

目的 通过重叠PCR方法获得AEG-1C-Flic融合基因,采用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统获得重组AEG-1C-Flic杆状病毒,为后续AEG-1C-Flic病毒样颗粒疫苗的制备奠定基础.方法从鼠伤寒沙门菌的基因组中PCR扩增细菌鞭毛蛋白Flagellin,采用重叠PCR的方法将AEG1肺归巢域段基因与Flagellin融合,并添加猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)包膜蛋白gp41信号肽与跨膜区,构建AEG-1C-Flic pFastBacTM重组表达载体,转座大肠杆菌E.coliDH10Bac感受态细胞后获得重组杆粒,重组杆粒转染昆虫细胞Tn5,获得AEG-1C-Flic重组杆状病毒,并采用Western Blot方法对该病毒进行鉴定.结果构建的AEG-1C-Flic杆状病毒表达载体经双酶切及测序正确,通过转化E.coli DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid,经PCR鉴定大小正确,Western Blot结果显示Bacmid转染Tn5细胞后成功获得重组杆状病毒rBv AEG-1C-Flic.结论成功构建的AEG-1C-Flic杆状病毒可用于新型AEG1-病毒样颗粒疫苗的制备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董轲	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	33	93	5.0	8.0
2	张惠中	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	196	724	13.0	17.0
3	王琳	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	77	375	12.0	16.0
4	龙敏	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	12	25	2.0	4.0
5	王希	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	14	28	2.0	5.0
6	张喆	第四军医大学唐都医院临床实验与检验科	6	7	2.0	2.0