GⅡ型诺如病毒微滴式数字RT-PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 冼钰茵 凌莉 易蓉 李志勇 管锦绣 翁文川 许喜林
• 来源期刊: 现代食品科技
• 关键词: 实时荧光RT-PCR 微滴式数字RT-PCR GⅡ型诺如病毒 灵敏度 重复性 西生菜
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 222-228
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2018.05.032

摘要

为了建立快速准确的GⅡ型诺如病毒定量检测方法,本研究将微滴式数字RT-PCR技术应用于GⅡ型诺如病毒检测中,并与实时荧光RT-PCR法进行了比对.微滴式数字RT-PCR反应退火温度的优化实验确定了其最佳退火温度为56℃,实时荧光RT-PCR和微滴式数字RT-PCR两种方法的灵敏度实验对比表明微滴式数字RT-PCR法检测GⅡ型诺如病毒的灵敏度为5.40 copies/μL,其灵敏度高于实时荧光RT-PCR法,重复性实验对比表明两种方法在检测中间浓度的GⅡ型诺如病毒时重复性均较好;人工污染西生菜实验中表明微滴式数字RT-PCR法最低检测限为54.00 copies/μL.本研究建立的GⅡ型诺如病毒的微滴式RT-PCR检测方法,灵敏度高,重复性良好,在人工污染西生菜GⅡ型诺如病毒的检测中表现理想,具有良好的应用前景.