传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法的建立

• 作者: 丁树荣 刘华栋 唐娟 李婷婷 王彩先 詹丽娥 陆冰洋
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性法氏囊病病毒 RT-LAMP 检测 灵敏度 特异性 颜色反应
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 135-139,243
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65+9.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.07.0036

摘要

为了建立传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法, 用于快速检测传染性法氏囊病, 从而评估禽类动物健康情况, 试验针对传染性法氏囊病病毒VP3序列设计引物, 优化反应时间、温度、体系等获取最佳反应参数, 对建立的传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法的灵敏度、颜色变化、特异性进行研究并应用该方法检测临床疑似病料.结果表明:传染性法氏囊病病毒在60℃75 min和80℃10 min条件下目标核酸区段大量扩增, 以此条件成功建立针对鸡传染性法氏囊病病毒的RTLAMP检测方法;在模板浓度为994.9 ng/μL并进行10倍稀释的情况下, 所建立的RT-LAMP检测方法具有极高的灵敏性, 可以检测到99.49 fg/μL的样品, 比RT-PCR方法的灵敏度高100倍左右;在RT-LAMP的检测结果中加入Gene Finder可使阳性结果变为绿色;该方法只有鸡传染性法氏囊病病毒发生反应, 表现出良好的特异性;在临床疑似病料检测中, RT-LAMP检测方法的检出率高达93.75％, 比RT-PCR检测方法高25.00％.说明试验建立的传染性法氏囊病病毒RT-LAMP检测方法具有简便、灵敏、快速、强异性高等优点, 可用于临床鸡传染性法氏囊病病毒的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王彩先		63	276	8.0	15.0
2	刘华栋		31	37	3.0	4.0
3	詹丽娥		45	115	6.0	9.0
4	陆冰洋		44	66	4.0	6.0
5	唐娟		37	60	4.0	6.0
6	李婷婷		18	7	2.0	2.0
7	丁树荣		17	4	1.0	1.0