苹果愈伤组织SSR-PCR反应体系优化

• 作者: 孙俊 安文杰 高兵
• 来源期刊: 北方园艺
• 学科: 农学
• 关键词: 苹果 愈伤组织 SSR-PCR 体系优化
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 53-56
• 页数: 4页
• 分类号: S661.103.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.11937/bfyy.20173431

摘要

以“嘎啦”苹果组培苗叶片诱导的愈伤组织作为DNA模板提取材料,采用正交设计,摸索了SSR反应体系中Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA、dNTP的最适浓度,可为苹果愈伤组织的遗传变异研究奠定基础.结果表明:各因素不同水平变化对反应体系的影响为Taq DNA聚合酶＞dNTP用量＞Mg2+用量＞引物用量=模板DNA浓度.确立了苹果愈伤组织SSR-PCR最佳反应体系总体积25 μL,其中4 μL 25 mmol·L-1 Mg2+,0.25 μL 5 U·μL-1 Taq DNA聚合酶,3 μL 0.01 mmol·L-1 SSR引物,1μL 30 ng·μL-1模板DNA,4μL 2.5 mmol·L-1 dNTP,2.5 μL10×PCR Buffer,10.25 μL超纯水.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙俊	南京农业大学园艺学院	10	85	6.0	9.0
5	高兵	山西林业职业技术学院园艺系	5	33	3.0	5.0
9	安文杰	山西林业职业技术学院园艺系	10	4	1.0	1.0