黄淮白山羊瘤胃微生物Fosmid文库的构建与分析

• 作者: 凌婵 华金玲 施其成 王淑娟 郁冯艳 郭亮
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄淮白山羊 瘤胃微生物 Fosmid文库 木聚糖酶 纤维素酶
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 52-58
• 页数: 7页
• 分类号: S826
• 字数: 5980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2019.01.007

摘要

采用CTAB法和蛋白酶K法提取黄淮白山羊瘤胃微生物总DNA,酶切获得DNA片段,大小为23～50 kb,以E.coli EPI300为宿主细胞,构建瘤胃微生物宏基因Fosmid文库.研究发现该文库共获得克隆28 800个,插入片段大小约35 kb,空载率小于2％,容量1 008 Mb.通过羧甲基纤维素酶和木聚糖酶(Xylanase)活性筛选,分别获得具有两种酶活性的阳性克隆60和32个,木聚糖酶和羧甲基纤维素酶(CMC,Carboxymethyl cellulase)共同作用阳性克隆15个.通过已测序MF3木聚糖酶阳性克隆酶学活性分析,该木聚糖酶在最适应pH 4.5,40℃条件下,酶活力为79.287μ·mL-1.为进一步研究黄淮白山羊瘤胃内纤维素酶(Cellulase)基因奠定基础.