鼠IL-10基因腺病毒载体的构建及在骨髓间充质干细胞中的表达

• 作者: 唐娟 张文婷 游洁玉 赵红梅
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 关键词: 炎症性肠病 IL-10基因 腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 大鼠
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 708-712
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7499/j.issn.1008-8830.2019.07.017

摘要

目的 构建携带鼠IL-10(rIL-10)基因重组腺病毒载体,并探讨其能否在鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中稳定表达.方法 rIL-10引物经PCR扩增rIL-10 cDNA序列,将回收到的656 bp rIL-10 DNA片段克隆入pcDNA3.1载体中,构建pcDNA3.1-IL-10,将其与腺病毒载体共转染HEK293细胞,进行细胞内同源重组,经测序及聚合酶链反应(PCR)鉴定重组是否成功;反复冻融裂解HEK293细胞,将获得的含rIL-10基因的病毒液感染MSCs,Western blot法检测rIL-10在MSCs中的表达.结果 经测序及PCR验证,rIL-10基因腺病毒载体构建成功,病毒滴度达4×109 PFU/mL.含rIL-10基因的病毒液体外感染MSCs后,可检测到IL-10的表达.结论 构建重组腺病毒能够介导rIL-10基因在MSCs中的稳定表达,为下一步基因移植治疗炎症性肠病提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵红梅	湖南省儿童医院消化营养科	43	194	6.0	13.0
2	游洁玉	湖南省儿童医院消化营养科	78	321	9.0	14.0
3	张文婷	湖南省儿童医院消化营养科	15	37	3.0	6.0
4	唐娟		1	0	0.0	0.0