甘薯薯瘟病菌特异性PCR快速检测方法

• 作者: 刘中华 张鸿 李华伟 李国良 林志坚 林赵淼 汤浩 王嘉滢 纪荣昌 罗文彬 许泳清 邱思鑫 邱永祥
• 来源期刊: 江苏师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 甘薯薯瘟病 青枯菌 PCR 检测
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 甘薯生物学与产业技术
• 页码范围: 37-41
• 页数: 5页
• 分类号: S531|S432.1
• 字数: 4356字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4298.2019.04.008

摘要

针对目前甘薯薯瘟病鉴定耗时长,且缺乏特异性标记的问题,首先根据薯瘟病菌Ralstonia solanacearum特异性基因orf428设计了一对特异性分子检测引物,对13株薯瘟病菌、3株甘薯其他病原细菌和12株其他7种寄主青枯菌进行PCR检测,结果显示,只有薯瘟病菌能特异扩增1 641 bp的目标序列,且对菌体DNA最低检出率达到1 pg/μL.其次,通过水煮法快速提取DNA,简化了DNA提取方法;在PCR体系中加入体积分数为1％的二甲基亚砜(DMSO)后,扩增条带更为明亮,优化了PCR检测体系.此技术易于操作、灵敏度高、特异性强,可用于对病残体、发病植株和种苗中的薯瘟病菌检测,以对甘薯薯瘟病进行预测、监测及防治具有重要意义.