表达APPswe695基因细胞系的构建及Aβ分泌水平的分析

• 作者: 宋喜君 赵悦 陶鹏飞 黄汉昌
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 阿尔茨海默病 β-淀粉样前体蛋白 β-淀粉样蛋白 细胞模型
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 72-79
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2019.01.0008

摘要

为探究β-淀粉样前体蛋白(amyloid-β precursor protein,APP)在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)发病过程中的作用及构建应用于AD发病机理研究的实验细胞模型,该研究构建了过表达APP695瑞典型突变体(APPswe695)的SH-SY5Y细胞系(APPswe695细胞)并分析了该细胞系中Aβ的分泌水平.采用慢病毒介导转染方法,将APPswe695表达质粒转染至SH-SY5Y细胞,抗性药物筛选阳性转染细胞.分别采用RT-PCR、WesteRN blot技术验证APPswe695 mRNA、APP蛋白的表达,ELISA分析Aβ1-40和Aβ1-42的分泌水平.结果显示,转染慢病毒包装的APPswe695质粒后,细胞的APPswe695mRNA表达呈现阳性;与野生型细胞和转染质粒空白细胞相比,转染APPswe695基因细胞表达APP695的瑞典型突变蛋白(APPswe695).APPswe695具有与内源性APP770相同的细胞分布.转染APPswe695基因后,细胞内分泌Aβ水平增加(P＜0.05)而细胞外液中Aβ含量并没有显著变化.由此说明,APPswe695细胞能够表达被转染的APPswe695基因,APPswe695细胞倾向于产生更多的胞内而不是胞外Aβ,APPswe695细胞可应用于阿尔茨海默病发病机理及药物治疗的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄汉昌		42	263	8.0	15.0
2	陶鹏飞		2	0	0.0	0.0
3	赵悦		2	101	1.0	2.0
4	宋喜君		3	0	0.0	0.0