稳定表达RFP-GFP-LC3的大鼠胰岛β细胞株的构建

• 作者: 刘东波 刘明俊 吴艳阳 周佳丽 罗玉霜 袁玉菊
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 糖尿病 自噬 慢病毒转染 RIN-m5f细胞株
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 87-91
• 页数: 5页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.16605/j.cnki.1007-7847.2019.02.001

摘要

为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100％表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株.无血清饥饿处理细胞,结果显示:饥饿组GFP/RFP荧光点比值较对照组下降,P62蛋白表达量以及S6K磷酸化水平降低,加入10μmol/L氯喹部分抑制自噬后,GFP/RFP荧光点比值回升.以上结果表明稳定表达RFP-GFP-LC3的RIN-m5f构建成功,并能够以简单的检测方式准确表达自噬全过程,为自噬在糖尿病药物机理方面的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘东波		46	445	15.0	18.0
2	袁玉菊		2	0	0.0	0.0
3	吴艳阳		5	1	1.0	1.0
4	周佳丽		2	4	1.0	2.0
5	罗玉霜		1	0	0.0	0.0
6	刘明俊		1	0	0.0	0.0