叉头状转录因子O1基因过表达慢病毒载体构建及其大鼠系膜细胞株的建立

• 作者: 刘飞 岳欣阁 张月 王庆祝 秦贵军
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 叉头状转录因子O1 慢病毒载体 过表达 系膜细胞 大鼠
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: R-332
• 字数: 4537字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建含组成性激活突变型FoxO1(CA-FoxO1)基因的过表达慢病毒载体,并建立其过表达的大鼠肾小球系膜细胞株.方法 通过四质粒合成法构建包含CA-FoxO1编码序列的过表达慢病毒载体(LV-CA-FoxO1).实验分为3组:空白对照组(NC组)、空慢病毒载体阴性对照组(LV-empty-FoxO1组)和过表达慢病毒载体组(LV-CA-FoxO1组).培养系膜细胞(RMCs)72h后,用流式细胞仪检测RMCs中绿色荧光蛋白(GFP)阳性率,并采用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测FoxO1的mRNA及蛋白表达情况.结果 成功构建LV-CA-FoxO1,其病毒滴度为1×108 TU/ml.LV-empty-FoxO1组和LV-CA-FoxO1组GFP阳性率分别为84.5％和81.4％;与NC组相比,LV-CA-FoxO1组FoxO1的mRNA与蛋白表达量相当于NC组的27.92倍与5.41倍(均P＜0.05);而NC组与LV-empty-FoxO1组FoxO1的mRNA及蛋白表达量差异均无统计学意义.结论 成功构建了大鼠FoxO1基因的过表达慢病毒载体,并建立了稳定过表达FoxO1的大鼠肾小球系膜细胞株,为进一步研究FoxO1的功能和作用机制奠定了研究基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘飞	郑州大学第一附属医院内分泌科	17	33	4.0	5.0
2	秦贵军	郑州大学第一附属医院内分泌科	172	638	12.0	18.0
3	张月	郑州大学第一附属医院老年内分泌科	40	187	5.0	13.0
4	王庆祝	郑州大学第一附属医院内分泌科	29	90	5.0	8.0
5	岳欣阁	郑州大学第一附属医院老年内分泌科	13	71	3.0	8.0