脑源性神经营养因子过表达慢病毒载体及稳定表达脂肪干细胞株的建立

• 作者: 付媛 冯素文 刘亦恒 张海英 彭誉 李剑星 李博 杨浩池 符玲玲 许革新 陆睿 陈明会 马志健
• 来源期刊: 海南医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 阿尔茨海默病 脂肪干细胞 慢病毒载体 脑源性神经营养因子
• 年，卷（期）: 2018,（24）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2107-2111
• 页数: 5页
• 分类号: R749.16
• 字数: 3126字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13210/j.cnki.jhmu.20181207.001

摘要

目的 :构建携带脑源性神经营养因子(BDNF)的重组慢病毒载体,并转染构建高表达BDNF的小鼠脂肪干细胞株.方法 :构建pHBLV-CMVIE-BDNF-ZsGreen-Puro慢病毒载体,测序鉴定载体构建情况,转染包装293T细胞,荧光显微镜下观察转染情况.收集到的病毒上清转染小鼠脂肪干细胞,Re-al-time PCR检测各组细胞BDNF mRNA水平,Western blotting法检测细胞中BDNF表达.结果 :经测序鉴定成功构建了pHBLV-CMVIE-BDNF-ZsGreen-Puro慢病毒载体.小鼠脂肪干细胞内BDNF mRNA水平及蛋白表达升高.结论 :本研究成功构建了BDNF慢病毒载体,建立了BDNF稳定表达的小鼠脂肪干细胞株,为BDNF基因修饰的脂肪干细胞在AD治疗的潜在应用打下基础.