PPARγ基因RNA干扰慢病毒载体构建及干扰Leydig细胞株建立

• 作者: 张玉敏 张磊 段志文 裴秀丛 马明月
• 来源期刊: 沈阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: PPARγ Leydig细胞 RNA干扰 慢病毒 TM3
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 预防医学研究
• 页码范围: 212-215
• 页数: 4页
• 分类号: R994.6
• 字数: 3081字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-2344.2013.04.008

摘要

目的:通过靶向过氧化物酶体增殖因子活化受体PPARγ基因阻断,建立稳定干扰Leydig细胞株TM3.方法:采用慢病毒四质粒包装系统构建特异靶向小鼠PPARγ基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,用以建立PPARγ基因稳定沉默的Leydig细胞株TM3.结果:经测序证实,成功构建编码表达PPARγ短发夹结构RNA (sh-PPARγ)的慢病毒载体LV3-sh-PPARγ及对照载体LV3-Control.病毒载体转导Leydig细胞株TM3后,荧光显微镜证实细胞转染效率＞90％,Real-time PCR测定实验组TM3细胞PPARγ的mRNA表达比未处理细胞下降70％ (P ＜0.05),对照组与未处理细胞差异无显著性(P＞0.05).Western blot显示实验组PPARγ蛋白表达量比未处理细胞明显下降(P＜0.05),对照组与未处理细胞差异无显著性(P＞0.05).结论:成功构建特异靶向小鼠PPARγ基因的RNAi慢病毒载体LV3-sh-PPARγ及对照载体LV3-Control,并成功建立PPARγ表达稳定干扰的小鼠Leydig细胞株TM3,为PPARγ生殖毒性研究提供了新的细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉敏	沈阳医学院公共卫生学院毒理学教研室	73	525	13.0	17.0
2	马明月	沈阳医学院公共卫生学院毒理学教研室	53	278	10.0	13.0
3	段志文	沈阳医学院公共卫生学院毒理学教研室	57	360	11.0	15.0
4	裴秀丛	沈阳医学院公共卫生学院毒理学教研室	36	141	6.0	9.0
5	张磊		17	37	3.0	6.0