构建表达膜锚定荧光素酶的载体实现细胞自发光成像

• 作者: 张硌 张鹏 陆琤
• 来源期刊: 中国医学装备
• 学科: 医学
• 关键词: 荧光素酶 膜锚定 生物发光 自发光成像
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 实验科学
• 页码范围: 145-147
• 页数: 3页
• 分类号: R-331
• 字数: 2774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1672-8270.2019.10.039

摘要

目的:构建能稳定表达膜锚定Gaussia荧光素酶(GLuc)的载体,以实现细胞自发光成像.方法:采用人源表皮生长因子受体(EGFR)、巨噬细胞集落刺激因子受体(MCSFR)、白细胞介素-4受体α链(IL4Rα)信号肽将GLuc的信号肽替换掉,并在GLuc后分别加上EGFR、MCSFR及IL4Rα的跨膜结构域,构建表达膜锚定的GLuc的载体,用慢病毒感染的方法将其导入永生化的小鼠外周血来源巨噬细胞(iBloodMC),通过在细胞和培养上清中加入GLuc底物检测发光,从而检测GLuc的表达.结果:iBloodMC GLuc-EGFR和iBloodMC GLuc-IL4Rα均能稳定表达荧光素酶,且iBloodMC GLuc-EGFR的GLuc表达量较高,EGFR将GLuc锚定在膜上效果较好.结论:表达膜锚定GLuc的载体构建成功,将其导入细胞,加入底物可实现细胞自发光成像.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张鹏	解放军总医院第五医学中心南院区医学工程科	14	13	2.0	3.0
2	陆琤	解放军总医院第五医学中心南院区医学工程科	1	0	0.0	0.0
3	张硌	解放军总医院第五医学中心南院区医学工程科	2	0	0.0	0.0