表面展示狂犬病病毒糖蛋白的重组乳酸菌的构建及其免疫原性的研究

• 作者: 刘琼 王建忠 王春凤 胡译文 谢静 赵建伟 赵维静 钱爱东
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 乳酸菌 狂犬病病毒糖蛋白 DCpep 黏膜免疫
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 432-439
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0072

摘要

为开发基于乳酸菌载体表达的新型狂犬病口服疫苗,合成狂犬病病毒糖蛋白主要抗原表位区基因RVG,并通过PCR方法在其C’端融合特异性树突状细胞(DC)靶向肽编码基因后插入到乳酸菌表达载体中,以融合无关肽编码基因为对照,分别构建表达RVG基因的重组乳酸菌pSIP-409-pgsA’-RVG-DCpep和pSIP-409-pgsA’-RVG-ctrl.在清酒乳杆菌素的诱导下,表达产物经Western-blot和免疫荧光鉴定后,对小鼠进行口服免疫,通过流式细胞术检测免疫后小鼠脾中树突状细胞和B细胞活化效率,用ELISA检测肠道内sIgA和血清IgG分泌量.结果 显示,该抗原表位区在重组乳酸菌中得到了正确表达,并且可锚定于菌体表面,pSIP-409-pgsA’-RVG-DCpep能有效活化小鼠脾中的树突状细胞和B细胞;与其他组相比差异显著(P＜0.05),且肠道内sIgA和血清IgG分泌量显著高于其他组(P＜0.05),表明重组乳酸菌pSIP-409-pgsA’-RVG-DCpep能够更好地激活黏膜免疫反应,具有良好的免疫原性.