慢病毒介导shRNA沉默AP2β对肝癌细胞生物特性的影响

• 作者: 丛瑞 初众 唐枝 徐小洁 朱祥 赵彩彦 霍楠 韩聚强 马路园
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,肝细胞 AP2β 短发夹RNA 慢病毒属 质粒 转染 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 669-673
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2019.09.008

摘要

目的 通过构建慢病毒介导的靶向AP2β基因短发夹RNA(shRNA)重组质粒,观察AP2β低表达对肝细胞癌(HCC)细胞生物学功能的影响.方法 构建人AP2β慢病毒shRNA质粒,将重组质粒转染至人胚肾293T细胞.AP2βshRNA与4个包装质粒共同转染293T细胞包装成慢病毒后感染HepG2细胞,经嘌呤霉素筛选2周后,收集细胞,通过实时定量PCR(qRT-PCR)及Western印迹检测AP2βshRNA干扰效果;利用CCK-8法和细胞划痕实验检测沉默AP2β对HepG2细胞生长、增殖及侵袭迁移的影响.结果 AP2βshRNA能有效沉默AP2β基因;CCK-8法、细胞划痕实验提示,沉默AP2β可促进HepG2细胞生长、增殖及侵袭迁移.结论 慢病毒介导的AP2β敲减重组质粒构建成功,且沉默AP2β可促进HepG2细胞生长、增殖及侵袭迁移,因此AP2β可能是HCC治疗的一个潜在新靶点.