靶向沉默IGF1R基因miR30-shRNA慢病毒的构建及其抗肝癌细胞生长

• 作者: 于彬 刘斌 李向农 牛坚
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 RNA干扰 受体,IGFl型 慢病毒
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 肝肿瘤专题研究
• 页码范围: 703-707
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文

摘要

目的 研究靶向人胰岛素样生长因子1类受体(IGFIR)基因miR30-shRNA慢病毒对肝癌细胞生长的影响.方法 针对已经筛选确定的IGF1R基因干扰有效序列,合成靶序列的OligoDNA,退火形成双链DNA,与经XhoI和EcoRI酶切后的pPRIME载体连接产生pPRIME-IGF1R-miR30-shRNA.用后者,psPAX2及pMD2G 3质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒.慢病毒PRIME-IGF1R-miR30-shRNA大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度.RT-PCR及Western blot检测IGF1R表达,CCK-8法检测细胞生长.结果 成功构建PRIME-IGF1R-miR30-shRNA,滴度为4.58×109>PFU/mL;该慢病毒能抑制肝癌细胞IGF1R表达及生长.结论 IGF1R基因miR30-shRNA慢病毒靶向转染可有效地封闭肝癌细胞的IGF1R表达,降低肝癌细胞的增殖能力,为以IGFIR基因为靶点的肝癌生物治疗的进一步研究奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李向农	徐州医学院附属医院普通外科	82	277	8.0	10.0
2	刘斌	徐州医学院附属医院普通外科	85	312	8.0	12.0
3	牛坚	徐州医学院附属医院普通外科	48	241	8.0	12.0
4	于彬	上海交通大学肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室	7	51	4.0	7.0