Survivin-pPRIME-IGF1R-miR30慢病毒载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制

• 作者: 于彬 刘斌 李向农 牛坚 王月
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 人胰岛素样生长因子1类受体 survivin启动子 慢病毒 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 302-307
• 分类号: R735.7|R730.54
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2010.03.011

摘要

目的:探讨survivin启动子调控的重组慢病毒survivin-pPRIME-IGF1R-miR30载体(简写为sur-IGF1R-miR30)对肝癌Hep3B细胞IGF1R表达和细胞生长的影响.方法:PCR扩增survivin启动子,构建sur-pPRIME;将针对IGF1R基因的干扰序列与sur-pPRIME载体连接,构建sur-IGF1R-miR30慢病毒载体.将sur-IGF1R-miR30、psPAX2和pMD2G质粒共转染293T细胞,扩增慢病毒,检测病毒滴度.以sur-IGF1R-miR30感染人肝癌Hep3B细胞和胎肝L-02细胞,RT-PCR、Western blotting检测Hep3B细胞IGFIR的表达,CCK-8法检测Hep3B细胞的生长.结果:成功构建survivin启动子调控的慢病毒载体sur-IGF1R-miR30,滴度为4.58×109PFU/ml.Sur-IGF1R-miR30感染后,Hep3B细胞中特异表达荧光蛋白,L-02细胞中基本没有表达.Sur-IGF1R-miR30感染Hep3B细胞可阻断IGF1R mRNA和IGF1R蛋白的表达.Sur-IGF1 R-miR30感染抑制肝癌细胞的生长,第7天时的抑制率达60%(P＜0.05).结论:成功构建的重组慢病毒载体sur-IGF1R-miR30可有效地降低肝癌细胞中IGF1 R的表达,抑制肝癌细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李向农	徐州医学院附属医院普外科	82	277	8.0	10.0
2	刘斌	徐州医学院附属医院普外科	85	312	8.0	12.0
3	牛坚	徐州医学院附属医院普外科	48	241	8.0	12.0
4	王月	徐州医学院附属医院普外科	12	36	4.0	5.0
5	于彬	徐州医学院附属医院普外科	1	0	0.0	0.0