人AP2β基因慢病毒表达载体的构建及其对肝癌HepG2细胞生长的影响

• 作者: 丛瑞 亢小峰 初众 唐枝 徐小洁 朱祥 赵彩彦 霍楠 马路园
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: AP2β基因 慢病毒属 载体 肝肿瘤 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 105-109
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4729字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人AP2β基因慢病毒(lentivirus)表达载体,并检测其过表达对肝癌细胞HepG2生长的影响.方法 从人乳腺文库中采用PCR技术扩增出人AP2β基因编码序列,并将其插入pCDH载体,获得pCDH-AP2β真核表达载体;将其与包装载体转染293T,包装成Lenti-AP2β慢病毒并测定病毒滴度,感染肝癌HepG2细胞,Western印迹检测病毒载体介导的AP2β蛋白的表达情况,并进行生长曲线实验研究过量表达AP2β对HepG2细胞生长的影响.结果 双酶切和Western印迹表明,pCDH-AP2β真核表达质粒构建成功,包装成滴度为2.5×107 PFU/ml的Lenti-AP2β慢病毒载体;将此慢病毒载体感染HepG2细胞,Western印迹显示,慢病毒载体成功表达AP2β,生长曲线和克隆形成实验结果 表明,AP2β过表达可抑制肝癌细胞HepG2的生长.结论 构建了AP2β的慢病毒表达载体Lenti-AP2β,在HepG2细胞中过量表达AP2β可抑制细胞的生长,该实验为进一步研究AP2β在肝癌中的功能奠定了基础.