应用酵母双杂交系统筛选虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白

• 作者: 包振民 张玲玲 张阳 李仰平 李婉茹 李若佼 谢欣冉
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: FOXL2 虾夷扇贝 酵母双杂交 互作蛋白
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 54-59
• 页数: 6页
• 分类号: S917.4
• 字数: 4513字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16441/j.cnki.hdxb.20170357

摘要

FOXL2是脊椎动物的雌性决定基因,在多种无脊椎动物中也被认为是雌性决定与分化的关键基因,但其在无脊椎动物中的作用机制目前尚不清晰.本文利用Clontech酵母双杂交系统筛查虾夷扇贝FOXL2的相互作用蛋白.研究首先构建诱饵质粒pGBKT7-FOXL2,并检测诱饵蛋白的毒性及自激活活性,结果显示诱饵蛋白对酵母菌株无毒,也无自激活活性.利用该诱饵质粒,本研究从虾夷扇贝酵母双杂交cDNA文库筛选得到17个阳性克隆,测序验证得到12个读码框正确的阳性克隆,它们来自4种蛋白:COP9信号复合体亚基5、钠/钾ATP酶β3、哺乳动物室管膜相关蛋白1和胰脂肪酶相关蛋白2.研究进一步将诱饵质粒与4种蛋白的猎物质粒进行共转化验证,结果均为阳性,表明这4种蛋白与虾夷扇贝FOXL2都可能存在相互作用.本文为研究FOXL2在无脊椎动物性别决定与分化中的作用提供了参考.