人HNA-3a基因的克隆及其在HEK-293细胞的表达

• 作者: 何宏天 周浩 管政 陈丽
• 来源期刊: 蚌埠医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因表达 克隆 HNA-3a HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 6-8,13
• 页数: 4页
• 分类号: Q343
• 字数: 3122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2019.01.002

摘要

目的:构建人HNA-3a基因全长的真核表达载体,探索一种检测抗人HNA-3a抗体的实验方法,观察HNA-3a蛋白表达情况.方法:参照GeneBank中人HNA-3a基因序列,设计并合成引物,采用RT-PCR方法反转录HNA-3a基因外显子片段全长,定向克隆到pEGFP-N3载体中,然后采用LipofectamineTM 2000试剂将含目的基因的pEGFP-N3表达载体转染至HEK-293细胞中进行稳定表达,并以免疫荧光和蛋白质免疫印迹法(WB)鉴定目的基因的表达情况.结果:免疫荧光和免疫印迹结果显示,目的基因在HEK-293细胞中获高效表达.结论:成功构建了高效表达HNA-3a蛋白的真核表达载体,为检测人血浆中抗HNA-3a抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周浩	蚌埠医学院第一附属医院输血科	14	25	3.0	4.0
2	管政	蚌埠医学院第一附属医院输血科	11	52	4.0	7.0
3	何宏天	蚌埠医学院第一附属医院输血科	2	0	0.0	0.0
4	陈丽	蚌埠医学院第一附属医院输血科	10	26	3.0	5.0