利用CRISPR/Cas9系统敲除大肠杆菌tnaA基因

• 作者: 乐科易 何京桦
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: CRISPR/Cas9系统 敲除 大肠杆菌 tnaA基因
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-19
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2019.06.017

摘要

大肠杆菌的tnaA基因编码色氨酸酶,该基因的失活有利于大肠杆菌积累更多的L-色氨酸.利用CRISPR/Cas9系统介导的基因编辑技术对大肠杆菌tnaA基因进行敲除.首先针对tnaA基因设计CRISPR/Cas9作用靶点,构建gRNA表达质粒;随后人工设计同源修复供体基因序列,构建成完整的CRISPR/Cas9基因敲除系统;将该系统应用到大肠杆菌w3110-Δ中,经PCR和测序鉴定,证实目的基因tnaA敲除成功,敲除效率75％.成功构建了大肠杆菌tnaA基因敲除菌,为大肠杆菌L-色氨酸高产菌株的构建奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乐科易	复旦大学生命科学学院	5	20	2.0	4.0
2	何京桦	复旦大学生命科学学院	2	6	2.0	2.0