检测纽布病毒的Real-time RT-PCR方法的建立与应用

• 作者: 何琪富 岳华 张斌 汤承 郭紫晶
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: nebovirus 实时荧光定量RT-PCR 犊牛腹泻 检测
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 893-900
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5818字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.04.023

摘要

纽布病毒(nebovirus,NeV)是国内新发的犊牛腹泻病原,本试验目的是建立检测NeV的real-time RT-PCR方法.根据国内NeV流行株的聚合酶基因(RdRp)序列设计引物,通过反应条件和体系优化,成功建立基于TB Green检测NeV的real-time RT-PCR方法.结果 显示:该方法在2.9×101～2.9×109 copies·μL-1之间呈现良好的线性关系,线性相关系数R2 =0.999 4,扩增效率为98％;该方法只特异性检出NeV,不检出常见无关病原;最低检测下限为29 copies·μL-1;批内和批间的变异系数分别为0.89％～1.89％和0.83％～1.15％;该方法对临床样本的检出率高于文献报道的三种检测方法(P＜0.05).对2018年8-11月采自新疆和辽宁的135份奶犊牛腹泻样本中NeV的检出率为67.41％,场阳性率为100％ (15/15).所建方法的特异性和稳定性好、灵敏度高,为NeV的检测和流行病学调查提供了有力的手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何琪富	西南民族大学生命科学与技术学院	5	4	1.0	1.0
2	郭紫晶	西南民族大学生命科学与技术学院	4	4	1.0	1.0