Lipocalin噬菌体文库的构建及与FcεRI-α受体结合分子的初步筛选

• 作者: 张宏斌 彭华 程洁 马金魁 黄成志
• 来源期刊: 中国药学（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: Lipocalin FcεRI-α受体 Anticalin分子 噬菌体展示 肥大细胞
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 770-777
• 页数: 8页
• 分类号: R966
• 语种: 英文

摘要

根据Lipocalin蛋白家族的基因序列设计引物,通过PCR重叠延伸得到含随机突变蛋白的基因序列,重组到噬菌粒载体构建随机突变Lipocalin文库.以NSF60细胞对Lipocalin文库进行差减筛选,再用肥大细胞进行亲和筛选,得到结合肥大细胞的Lipocalin次级文库.以FcεRI-α受体蛋白为靶分子对Lipocalin次级文库进行富集筛选,洗脱特异性结合的噬菌体.经过3轮筛选,从第3轮的洗脱克隆中随机挑取8个重组噬菌体克隆.ELISA法检测出3个Anticalins分子能与肥大细胞FcεRI-α受体特异性结合.这为研发肥大细胞FcεRI-α受体阻断药物提供了生物类候选分子,也为IgE相关的变态反应疾病的生物类小分子药物研发奠定了基础.