噬菌体展示系统筛选糖尿病相关抗原蛋白及应用效果评价

• 作者: 刘尧 山云 徐良 林骏 梁永羿 王洪涛
• 来源期刊: 中国医药生物技术
• 关键词: 噬菌体展示系统 糖尿病 自身抗体 抗原表位
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 517-521
• 页数: 5页
• 字数: 4072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-713X.2019.06.007

摘要

目的 用噬菌体展示系统筛选与糖尿病相关的自身抗原新表位,表达新抗原肽段并评价其在糖尿病诊断中的应用效果.方法 以I型糖尿病血清作为靶分子,对Ph.D.-12噬菌体肽库进行淘选,测序淘选的噬菌体并用ELISA检测噬菌体与靶分子的结合效果,BLAST分析特异性最好的表位与糖尿病的相关性,选择合适的目的基因合成重组质粒,用Expi 293细胞表达新抗原肽段并检测该抗原与临床血清的特异结合效果.结果 共完成2418个噬菌体单克隆的测序,淘选出93种表位序列,11种具有代表性的表位中测序超过200次的有4种,对特异性最强的表位序列"-GTFLFSLCAAVY"进行分析后选择mTOR相关蛋白mEAK-7作为目的基因,抗原肽段与临床血清的特异性结合效果为:I型糖尿病阳性率为17％,II型糖尿病阳性率为4％.结论 mEAK-7蛋白对糖尿病血清具有一定的抗原特异性,该基因与糖尿病可能有相关性,具有很好的研究价值.