CRISPR/Cas9介导TKI对非小细胞肺癌基因靶向吉非替尼耐药敏感性的影响及其机制

• 作者: 任爱华 王大伟
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: CRISPR/Cas9 酪氨酸激酶抑制剂 癌,非小细胞肺 吉非替尼 耐药
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1288-1293,前插3
• 页数: 7页
• 分类号: R734.2
• 字数: 4924字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190616

摘要

目的:探讨CRISPR/Cas9介导酪氨酸激酶抑制剂(TKI)对非小细胞肺癌基因靶向吉非替尼耐药敏感性的影响,并阐明其机制.方法:利用CRISPR/Cas9系统建立酪氨酸激酶(TKs)敲除A549细胞株,按照TKI表达情况分为A549、A549TKs /+和A549TKs /细胞株.Western blotting法检测细胞株中P53、MDM2、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,CCK-8法检测A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞活性,细胞划痕实验检测A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞株的细胞迁移情况,流式细胞术检测A549、A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞凋亡率,克隆形成实验检测细胞集落形成情况.结果:CRISPR/Cas9系统成功建立了TKs敲出A549细胞株,A549、A549TKs/+和A549TKs /细胞活性比较差异无统计学意义(P＞0.05);3种细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P＞0.05),细胞迁移情况变化不大.经6 mol· L-1吉非替尼干预72 h后,与A549细胞株比较,A549TKs/+和A549TKs /细胞株的细胞活性降低(P＜0.05),细胞凋亡率升高(P＜0.05),细胞划痕愈合率明显降低(P＜0.05),细胞迁移能力明显减弱;与A549细胞株比较,A549TKs-/+和A549TKs-/-细胞株中P53和Bax蛋白表达水平降低(P＜0.05),MDM2和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P＜0.05),细胞集落生成率明显降低(P＜0.05).结论:采用吉非替尼对敲除A549细胞株进行干预可以降低细胞活性和迁移能力,升高细胞凋亡率和吉非替尼耐药的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	任爱华	北华大学医学院	12	23	2.0	4.0
2	王大伟	北华大学医学院	10	32	2.0	5.0