过表达 TPL2蛋白 BHK21细胞系的建立及其初步应用

• 作者: 刘湘涛 张克山 张大俊 张学刚 徐国伟 李国丽 申超超 郑海学 郝军红 闫鸣昊
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: TPL2基因 BHK-21细胞系 口蹄疫病毒 SVV病毒 慢病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1527-1534
• 页数: 8页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0215

摘要

利用慢病毒表达系统将 TPL2(COT和 MAP3K8)质粒稳定整合在乳仓鼠肾细胞(babyHamster Syrian kidney)BHK21细胞基因组染色体上,建立稳定表达 TPL2的 BHK21!TPL2细胞系.构建 TPL2质粒,通过基因合成将 TPL2基因和慢病毒载体 Lv-PCDH连接,得到重组慢病毒载体 Lv-TPL2.通过嘌吟霉素筛选得到的阳性细胞株 BHK21/TPL2即为稳定表达 TPL2蛋白的 BHK21细胞株.运用间接免疫荧光、激光扫描共聚焦显微技术、实时荧光定量 PCR和普通 PCR等技术分别验证 TPL2基因组整合、转录、反应活性以及FMDV、SVV在 BHK21/TPL2细胞株上的增殖效果.结果,TPL2基因被稳定整合在 BHK21细胞基因组染色体上,建立的细胞系连续传代不丢失.接种病毒后致细胞病变严重,相对于正常的 BHK21/PCDH细胞,整合有 TPL2的 BHK21细胞对 FMDV、SVV的易感性显著增强.上述结果为 FMDV疫苗的研制和生产提供了更佳的功能细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘湘涛	中国农业科学院兰州兽医研究所	86	606	14.0	22.0
2	郑海学	中国农业科学院兰州兽医研究所	24	22	2.0	4.0
3	张克山	中国农业科学院兰州兽医研究所	9	12	2.0	3.0
4	郝军红	中国农业科学院兰州兽医研究所	2	0	0.0	0.0
5	闫鸣昊	中国农业科学院兰州兽医研究所	2	0	0.0	0.0
6	张大俊	中国农业科学院兰州兽医研究所	2	0	0.0	0.0
7	张学刚	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0
8	申超超	中国农业科学院兰州兽医研究所	2	0	0.0	0.0
9	徐国伟	中国农业科学院兰州兽医研究所	2	0	0.0	0.0
10	李国丽	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0