分离培养原代树鼩角膜基质细胞

• 作者: 孙子雯 张璐 李妍 李楠钰 胡竹林
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜基质细胞 体外培养 树鼩 组织工程
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 109-115
• 页数: 7页
• 分类号: R-33
• 字数: 5194字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2019.05.017

摘要

目的 探索一种简单、易行的体外快速、分离培养树鼩角膜基质细胞(corneal stromal cells,CSCs)的方法 .方法 实验分为实验组A和实验组B,取树鼩角膜基质层,实验组A剪碎,用1％ 的Ⅱ型胶原酶消化60 min,离心后重悬接种;实验组B用Ⅱ型胶原酶联合中性蛋白酶消化.比较记录原代及传代细胞生长情况、传代时间,细胞行波形蛋白免疫组化及免疫荧光鉴定.结果 胶原酶消化法可成功的获取原代细胞,9 d后即可进行传代,细胞形态好;传代细胞生长较快,2～3 d即可传一代;双酶消化法获得的CSCs较少,10 d才可见少量散落细胞,15～20 d可传代;波形蛋白免疫组化及免疫荧光表达阳性.结论 两种方法均可成功培养出CSCs,但胶原酶消化法能更容易高效分离培养出大量树鼩CSCs.