番茄细菌性斑点病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 帕提古丽 席先梅 李宝聚 柴阿丽 石延霞 谢学文 郭威涛
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番茄 丁香假单胞菌番茄致病变种 实时荧光定量PCR 种子检测 组织检测
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 新技术与新方法
• 页码范围: 182-192
• 页数: 11页
• 分类号: S641.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0294

摘要

以番茄细菌性斑点病病原菌丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato,Pst)的致病相关基因HrpZ为靶序列,设计了特异性引物Pst3F/Pst3R,能从Pst基因组DNA中特异性扩增出大小为161 bp的目的片段.建立的Pst实时荧光定量PCR检测技术体系的检测灵敏度比普通PCR高1 000倍.利用实时荧光定量PCR检测体系,检测模拟带菌种子中Pst的带菌量,检测下限为4.21 cfu·g-1;检测人工接种叶片组织中Pst的带菌量,检测到1级发病叶片带菌量为4.15×102 cfu·g-1.对田间采集的63个番茄细菌性斑点病明显症状和疑似症状样本,分别进行了实时荧光定量PCR、普通PCR和病原菌分离检测,检测到54个样本中含有Pst,3种方法检测结果一致.结果 表明,建立的Pst实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点,可以快速准确地定量检测番茄种子和发病组织中Pst的含量,为番茄细菌性斑点病的早期预防和流行监测提供了有效的技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	石延霞	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	196	1886	23.0	34.0
2	李宝聚	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	321	3006	28.0	39.0
3	谢学文	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	132	703	13.0	19.0
4	帕提古丽	新疆农业科学院园艺作物研究所	28	122	6.0	10.0
5	席先梅	内蒙古农牧业科学院植物保护研究所	34	172	7.0	11.0
6	柴阿丽	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	90	573	11.0	20.0
7	郭威涛	中国农业科学院蔬菜花卉研究所	2	3	1.0	1.0