水稻高盐胁迫下的酵母双杂交文库构建及OsRPK1胞内互作蛋白质的筛选

• 作者: 刘园园 占新春 张培江 张炜 邹禹 郑乐娅 钱宝云
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 OsRPK1 高盐胁迫 酵母双杂交cDNA文库
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·生理生化
• 页码范围: 753-763
• 页数: 11页
• 分类号: Q943.2|S511
• 字数: 8953字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2019.04.001

摘要

为了挖掘水稻OsRPK1胞内互作蛋白质,阐明OsRPK1参与高盐胁迫的分子机制,本研究利用SMART技术,构建水稻高盐胁迫下根尖的酵母双杂交文库.PCR扩增获得OsRPK1基因编码胞内区域的碱基序列,构建诱饵表达载体(pGBKT7-OsRPK1-CD),检测诱饵表达载体在酵母中的毒性和自激活活性,筛选OsRPK1胞内互作蛋白,进一步分析高盐胁迫下候选基因的表达模式.结果表明,构建的cDNA文库库容量为1.11×107 CFU,文库重组率为96％,文库插入片段多态性较好.成功构建了诱饵表达载体(pGBKT7-OsRPK1-CD),经检测诱饵表达载体无毒性,无自激活活性.诱饵表达载体与cDNA文库进行双杂交筛选,经测序和比对分析获得了11个重要的候选基因,检测候选基因在高盐处理下的表达情况,其中8个候选基因受高盐诱导表达,2个候选基因受高盐胁迫抑制表达,1个候选基因受高盐胁迫瞬时诱导表达后表达量又受到显著抑制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张炜	南京农业大学生命科学学院	47	261	9.0	14.0
2	张培江	安徽省农业科学院水稻研究所	28	551	9.0	23.0
3	占新春	安徽省农业科学院水稻研究所	21	174	6.0	13.0
4	邹禹	安徽省农业科学院水稻研究所	6	2	1.0	1.0
5	郑乐娅	安徽省农业科学院水稻研究所	24	250	9.0	15.0
6	刘园园	南京农业大学生命科学学院	23	9	2.0	2.0
7	钱宝云	安徽省农业科学院水稻研究所	4	1	1.0	1.0