水稻LRR型受体蛋白激酶OsRPK1胞外区酵母双杂交诱饵载体构建

• 作者: 朱晓南
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻受体激酶 OsRPK 酵母双杂交 诱饵载体
• 年，卷（期）: 2015,（31）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 45-46,144
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2041字
• 语种: 中文

摘要

[目的]寻找水稻LRR型蛋白受体激酶(Leucine rich repeat receptor protein kinase) OsRPK1胞外结构域的互作蛋白.[方法]以日本晴水稻为研究材料,以水稻根部cDNA为模板通过PCR扩增方法得到OsRPK1胞外结构域基因编码片段OsRPK1-OD(969 bp).将该片段插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7,构建重组诱饵载体pGBKT7-OsRPK1-OD.[结果]对pGBKT7-OsRPK1-OD进行毒性检测和转录自激活鉴定,酵母生长结果发现,含有pGBKT7-OsRPK1-OD载体的Y2H Gold细胞,在SD/-Trp、SD/-Trp/X-α-gal营养缺陷型固体培养基上生长出白色菌落,在SD/-Trp/X-α-gal/AbA固体培养基上生长受到抑制;在SD/-Trp生长出含有pGBKT7-OsRPK1-OD载体的Y2H Gold酵母菌落大小与转化了空载的酵母菌落大小一致,显示插入的OsRPK1-OD对酵母生长无毒性作用.[结论]OsRPK1-OD无法参与激活转录酵母中报告基因HIS3,ADE2,MEL1和AUR1-C,该片段可以作为诱饵基因筛查水稻cDNA文库,寻找与之相互作用的蛋白质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱晓南	江南大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0