牛MSTN启动子与MEF2C转录因子相互作用的研究

• 作者: 周迪 朱晓锋 杨涛 王圆圆 许厚强 陈伟
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛 MSTN启动子 MEF2C转录因子 互作
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 1567-1575
• 页数: 9页
• 分类号: S823.2
• 字数: 5391字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.08.005

摘要

旨在解析牛MSTN启动子与MEF2C之间的相互调控作用,进一步探讨MSTN基因在肉牛肌肉生长发育方面的调控机制.首先,通过PCR扩增关岭牛MSTN启动子序列2 267 bp和MEF2C基因CDS区1 425 bp.其次,构建pGL3-Basic-MSTN和pcDNA3.1(+)-MEF2C双荧光素酶报告载体,采用脂质体法共转染至小鼠C2C12成肌细胞,24 h后检测其双荧光素酶活性.最后,通过PCR扩增MSTN启动子核心片段MSTN-P1,重新构建以MSTN-P1片段替代(CMV)区的重组表达载体pEGFP-N3-MSTN-P1-MEF2C,将其分别转染至小鼠C2C12成肌细胞和大鼠下颌腺上皮细胞,24 h后观察绿色荧光蛋白发光情况,48 h后提取细胞总RNA,利用qRT-PCR检测MEF2C基因在不同细胞中的表达情况.结果 显示,在小鼠C2C12成肌细胞中,共转染pcDNA3.1(+)-MEF2C试验组较pGL3-Basic-MSTN试验组能显著增强MSTN启动子的活性(P＜0.05),较pGL3-Basic对照组能极显著增强MSTN启动子的活性(P＜0.01);MSTN启动子核心片段MSTN-P1能驱动MEF2C基因在小鼠C2C12成肌细胞中的表达量极显著上调(P＜0.01),且能驱动MEF2C基因在大鼠下颌腺上皮细胞中的表达量显著上调(P＜0.05).结果 表明,在转录水平,MSTN启动子与MEF2C可能同时参与了牛肌肉生长和分化的调控.