表达EGFP标签的重组血清4型禽腺病毒的构建及评价

• 作者: 刘胜旺 李慧昕 柴冬华 邵昱昊
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽腺病毒 血清4型 重组病毒 绿色荧光蛋白标签
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 998-1005
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0104

摘要

我国当前流行的禽腺病毒血清4型(FAdV-4)毒株与国外毒株相比存在自然缺失.为了解我国流行的FAdV-4毒株的复制能力和特点以及病毒毒力的增强机制,本研究以我国当前流行的基因组3'端自然缺失株HN/151025为亲本病毒,采用同源重组技术,在HN/151025毒株基因组35430～35431自然缺失位点插入EGFP表达盒,构建带有EGFP标签的重组病毒rHN-△35430-EGFP.获得的重组病毒在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,重组病毒在LMH细胞连续传代5代,EGFP基因随病毒的传代而稳定遗传,且EGFP蛋白稳定表达.病毒生长曲线测定结果显示,带有EGFP标签的重组病毒与亲本病毒的生长动力学趋势基本一致,均在接种后第96小时病毒滴度达到高峰,但是重组病毒滴度与亲本病毒差异显著(P＜0.05).对重组病毒感染细胞能力进行评价,结果表明,表达荧光信号的细胞比例从感染后第24小时逐渐增多,至感染后第96小时达到高峰,该结果与病毒生长曲线结果一致.本研究结果表明,FAdV-4病毒基因组3'端可作为标签基因插入位点,为进一步研究病毒复制和感染机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘胜旺	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	53	724	15.0	25.0
2	李慧昕	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	3	17	2.0	3.0
3	邵昱昊	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	4	20	2.0	4.0
4	柴冬华	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	1	0	0.0	0.0