表达绿色荧光蛋白的重组1型禽腺病毒的构建

• 作者: 周洁 胡建华 赵莉 高诚
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组Ⅰ型禽腺病毒 鸡肝癌细胞系 增强型绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 249-255
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 5823字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2013.04.001

摘要

目的 构建表达绿色荧光蛋白的重组禽腺病毒.方法 通过带有禽腺病毒基因组复制非必需区(nt40065～nt43684)侧翼序列和增强型绿色荧光蛋白基因的转移质粒与亲本禽腺病毒在鸡肝癌细胞内同源重组,缺失掉了两侧翼序列之间的复制非必需区而替换为增强型绿色荧光蛋白基因的完整表达盒.为提高同源重组率,对质粒转染细胞的条件进行了摸索,确定了最佳转染条件为细胞以3×105/ml密度接种到6孔板上,36h后用8μl lipofectamine 2000试剂和3μg pUC-LR-eGFP质粒转染,蚀斑方法筛选重组病毒.结果 获得了表达EGFP的重组病毒单一克隆株rFAV-Ⅰ-eGFP.结论 研究结果为开展禽类活载体疫苗研制及相关基础研究提供了有利参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高诚		61	229	7.0	12.0
2	胡建华		55	297	7.0	15.0
3	赵莉		5	28	3.0	5.0
12	周洁		19	51	5.0	6.0