食管癌细胞株Eca109中cdc42基因启动子区CpG岛甲基化调控报告基因的表达

• 作者: 伊丽达娜·斯提瓦尔地 刘玲 喻亮 张法煌 李依珂 李卉 李惠武 陈艳
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Eca109细胞株 cdc42 甲基化 报告基因
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 691-695
• 页数: 5页
• 分类号: R349.64
• 字数: 4721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.05.005

摘要

目的 研究细胞周期分裂蛋白42(cdc42)的启动子区CpG岛是否作为调节因子参与基因表达的调控.方法 选择消化道肿瘤早期相关基因cdc42为研究对象,构建氯霉素乙酰基转移酶3-增强子(pCAT3-Enhancer)重组体:内含cdc42基因启动子区第一个CpG岛的序列及一段不含CpG岛序列,非甲基化修饰的重组体和pCAT3-Enhancer空载体转化至甲基化酶缺陷大肠杆菌中(ER1793),经甲基化酶修饰后的重组体及空载体转化至可持续甲基化状态的大肠杆菌中(JM109),阳性克隆转染至Eca109中,提取蛋白,通过薄层层析检测氯霉素乙酰基转移酶(CAT)活性.结果 转染至细胞株后,甲基化空载体CAT的活性显著低于非甲基化的;任意DNA-pCAT3-Enhancer重组体甲基化及非甲基化CAT的活性无差异;cdc42启动子区CpG岛-pCAT3-Enhancer重组体,甲基化CAT的活性显著低于非甲基化CAT的活性,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 通过食管癌细胞株Eca109实验,cdc42启动子区CpG岛的甲基化修饰后,CAT的活性降低,非甲基化CAT仍保持较高活性.说明cdc42启动子区CpG岛甲基化程度的改变具有调节下游基因表达的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈艳	新疆医科大学基础医学院	164	528	11.0	15.0
2	李卉	新疆医科大学中心实验室	57	123	5.0	7.0
3	刘玲	新疆医科大学基础医学院	68	117	5.0	8.0
4	张法煌	新疆医科大学基础医学院	4	1	1.0	1.0
5	李依珂	新疆医科大学第一临床医学院	2	2	1.0	1.0
6	伊丽达娜·斯提瓦尔地	新疆医科大学第一临床医学院	2	2	1.0	1.0
7	喻亮		1	1	1.0	1.0
8	李惠武		1	1	1.0	1.0