金黄色葡萄球菌肠毒素阵列ELISA检测方法的建立及评价

• 作者: 刘鹏 姜永强 孔德聪 律清宇 欧阳譞 江华 郑玉玲 韩雪莲 黄文华
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌肠毒素(SE) 阵列ELISA(Array-ELISA)
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 695-701
• 页数: 7页
• 分类号: S852.4+4|R446.61|R378.1+1
• 语种: 中文

摘要

目的 为实现对5种经典肠毒素的准确、快速鉴定及分型,本研究基于ELISA和芯片技术,建立金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阵列ELISA (Array-ELISA)检测方法.方法 通过原核表达、亲和纯化制备SE蛋白,利用杂交瘤腹腔注射制备腹水,纯化SE单克隆抗体,通过ELISA对抗体的灵敏度、特异性进行评价,点制Array-ELISA阵列,评价Array-ELISA对SE检测的灵敏度和特异性.结果 采用Array-ELISA,在PBS中SE的检测限除葡萄球菌肠毒素C(SEC)为10 ng/mL外,其余均为0.0001 ng/mL,液态牛奶中SE的检测限为(0.001～10) ng/mL.在PBS和牛奶中SE检测的特异性均为100％,各型SE之间无交叉反应.同时显示与肉毒毒素也无交叉反应.结论 成功建立Array-ELISA检测方法,能够灵敏、准确鉴定同一份样本中5种经典SE.