截短腐败梭菌α毒素的表达及其免疫原性评价

• 作者: 彭国瑞 彭小兵 李旭妮 蒋玉文
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 腐败梭菌 截短α毒素 毒性 免疫原性
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 220-225
• 页数: 6页
• 分类号: S852.616.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0028

摘要

为了获得截短腐败梭菌α毒素并评价其毒性、反应原性和免疫原性,根据腐败梭菌α毒素的结构与功能,设计2对引物分别扩增含有穿孔活性区和受体结合区的α毒素基因csaN和csaC,克隆至pET-28a(+)质粒,构建截短α毒素表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导csaN和csaC表达,鉴定产物的反应原性和毒性,将经过诱导表达的工程菌灭活制成铝佐剂疫苗免疫家兔1次,通过血清中和试验和攻毒保护试验评价免疫效力,设立重组α全毒素rcsa免疫组作为阳性对照.结果 显示,2个截短α毒素在大肠杆菌BL21(DE3)中均获得表达,产物能够与腐败梭菌抗毒素血清发生特异性反应,但失去了小鼠致死毒性.免疫家兔血清中和试验结果显示,csaN组血清的中和效价为1 MLD/0.1 mL,达到《中华人民共和国兽药典三部(2015年版)》效力检验的最低标准,csaC组为0,rcsa组为8 MLD/0.1 mL;csaN和csaC组家兔用1 MLD毒素攻击均未获得保护,而rCSa组家兔4/4获得保护.结果 表明,截短α毒素与全毒素相比,失去了毒性但保留了反应原性,仅含穿孔活性结构区的截短部分具有较弱的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭妮		22	53	5.0	6.0
2	蒋玉文		72	389	11.0	17.0
3	彭小兵		35	163	6.0	12.0
4	彭国瑞		29	37	3.0	4.0