基于转录组学筛选miR-125b-2敲除小鼠睾丸发育相关基因及信号通路的研究

• 作者: 习欠云 何家建 孙加节 张永亮 曾斌 朱燕玲 李龙龙 罗君谊 陈婷
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: miR-125b-2 转录组学 睾丸发育 精子发生 线粒体
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术与繁殖
• 页码范围: 2022-2031
• 页数: 10页
• 分类号: S813
• 字数: 5254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.10.008

摘要

旨在研究miR-125b-2对动物精子发生和成熟的调节作用,挖掘与miR-125b-2有密切靶向关系的功能基因及信号通路.本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建了miR-125b-2基因敲除小鼠模型.将3只野生型(WT)小鼠和3只miR-125b-2敲除型(KO)小鼠睾丸的总RNA样分别制成样品池,采用Illumina HiSeqTM 4000平台进行转录组测序(RNA-seq),将组装得到的Unigene序列注释到Nr和KEGG数据库中注释,并进行睾丸差异表达基因(DEGs)聚类分析.结果 显示,在WT和KO组睾丸组织中共筛选出324个DEGs,其中被GO注释的180个DEGs显著富集到80个包括精子染色质缩合在内的生物学过程,22个含有线粒体内膜预序列转位酶复合物在内的细胞组成以及41个包括核糖体结构组成在内的分子功能.同时KEGG分析显示,所有被注释的DEGs显著富集到74条信号通路,其中排前3位极显著的信号通路依次为:RNA转运、信使RNA监视通路和合硒化合物新陈代谢.综上表明,敲除miR-125b-2主要影响睾丸中与精子染色质结构和线粒体功能相关基因的表达,其中与精子发生相关的3个基因Papolb、Tssk1和Slc22a14表达均显著上调.结果 为进一步研究miR-125b-2对精子生成的功能调节提供基础.