小鼠Na+-K+-2Cl-共转运蛋白基因启动子克隆及20-HETE对其转录活性的影响

• 作者: 孔令慧 武晶晶 贾茹
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Na+-K+-2Cl-共转运蛋白 启动子 20-HETE 基因克隆
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-33
• 页数: 5页
• 分类号: R394
• 字数: 3492字
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆小鼠Na+-K+-2Cl-共转运蛋白(Nkcc2)基因启动子序列,初步探讨20-HETE对该基因转录活性的调控作用.方法 应用生物信息学软件ALiBaba2.1和TRANSFAC TESS分析小鼠Nkcc2基因启动子序列;以小鼠基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增得到小鼠Nkcc2基因启动子区片段(-1 462 bp～+40 bp),并克隆入pGL3-Basic载体,构建萤光素酶报告基因载体;脂质体法将重组报告基因载体转染到HEK293T细胞24 h后,再以20-HETE处理转染细胞2 h,利用双萤光素酶报告基因检测系统分析萤光素酶活性.结果 成功构建小鼠Nkcc2基因启动子萤光素酶报告基因载体;20-HETE可以显著下调小鼠Nkcc2基因启动子萤光素酶报告基因载体的转录活性.结论 20-HETE通过转录调控机制下调小鼠Nkcc2基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾茹	中国医科大学生命科学学院医学遗传学教研室	2	0	0.0	0.0
2	武晶晶	中国医科大学生命科学学院医学遗传学教研室	1	0	0.0	0.0
3	孔令慧	中国医科大学生命科学学院生物科学系	1	0	0.0	0.0