人铁氧还蛋白表达载体构建

• 作者: 尚书凤 田瑞莹 许兰 陈思航
• 来源期刊: 科技创新导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 铁氧还蛋白 细胞色素P450 表达载体
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 工业技术
• 页码范围: 82-84,86
• 页数: 4页
• 分类号: Q559
• 字数: 2451字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16660/j.cnki.1674-098X.2019.07.082

摘要

目的 为了将人铁氧还蛋白(adrenodoxin,FDX)在293T细胞中表达,扩增FDX的ORF,将FDX的ORF插入到哺乳动物细胞表达载体pcDNA的NotI/KpnI,构建表达载体.方法 以GeneBank报道的FDX的mRNA序列(NM_004109.5)为模板设计引物,在5'和3'分别引入限制性酶切位点NotI和KpnI,从HepG2的cDNA中扩增FDX的ORF,将FDX的PCR产物和空载体pcDNA3.1用NotI和KpnI双酶切4 h,酶切产物用DNA回收试剂盒回收.将FDX的PCR酶切产物分别连接到空载体NotI/KpnI,连接产物转化DH5α,培养过夜.挑单克隆,用PCR鉴定阳性克隆并测序.结果 经1％琼脂糖凝胶电泳和EB染色,观察到一500 bp条带,阳性克隆的测序结果与GeneBank报道的核酸序列一致.结论 应用常规分子克隆方法已成功构建了FDX的真核表达载体pcDNA-FDX.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许兰		1	0	0.0	0.0
2	陈思航		1	0	0.0	0.0
3	田瑞莹		1	0	0.0	0.0
4	尚书凤		1	0	0.0	0.0