柽柳cpSSR-PCR反应体系的建立和优化

• 作者: 张如华 张连梅
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 柽柳 叶绿体微卫星 反应体系 正交试验
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 动物科学·生物技术
• 页码范围: 105-107
• 页数: 3页
• 分类号: S718.4
• 字数: 2477字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2019.09.031

摘要

[目的]建立并优化柽柳cpSSR-PCR反应体系和反应条件.[方法]对影响PCR反应的5个变量(Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度)进行L16(45)正交试验设计,并对引物退火温度进行梯度筛选.[结果]最优反应体系:Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 0.125 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.25 U、引物0.25μmol/L、模板DNA 20 ng,共10μL.反应程序:94℃预变性4 min;94℃30 s,引物退火温度30 s,72℃30 s,30个循环;72℃延伸10 min.[结论]该反应体系成功扩增1个柽柳天然群体的23个个体,为柽柳群体扩散路线的确定奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张如华	临沂大学生命科学学院	4	4	1.0	2.0