牛流行热病毒TaqMan实时定量PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 李守军 汪祥斌 贾坤 贾荣荣
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛流行热病毒 TaqMan探针 实时定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 491-495
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.03.08

摘要

通过对牛流行热病毒(bovine ephemeral fever virus,BEFV)中G片段保守区的分析,运用SnapGene设计探针、引物,并优化反应条件.运用最适条件对该方法的敏感性、特异性及重复性进行试验,并检测临床采集的样品.结果 显示,本方法特异性较好,其对牛蓝舌病病毒、牛赤羽病病毒进行检测的结果为阴性.该方法线性关系较好,在105～1010拷贝/μL相关系数达到0.998.该方法较为灵敏,可检测到10拷贝/μL.批内和批间分别重复3次试验得到的变异系数平均值结果较低(＜3％).使用该方法对广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室收集的109份牛抗凝血样品进行检测,阳性率为7％.本试验成功建立牛流行热病毒TaqMan实时定量PCR检测方法,并将该方法初步运用于牛流行热病毒的临床检测,为BEFV在临床上的快速检测提供更好的方法.