携带线粒体tRNAMet4435A＞G突变的原发性高血压家系的线粒体功能研究

• 作者: 管敏鑫 黄慧敏
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 原发性高血压 线粒体tRNAMet基因 功能障碍 突变
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 220-229
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2020.02.0007

摘要

该研究通过构建携带突变的永生化淋巴细胞系,探讨线粒体tRNAMet4435A＞G突变(以下简称为m.4435A＞G)对原发性高血压线粒体功能的影响.首先,提取携带m.4435A＞G家系中的静脉血中的淋巴细胞,建立为永生化类淋巴细胞并设为突变组,同时选取与家系相同G2a1单体型的正常永生化淋巴细胞为对照组;其次,对两组细胞进行tRNA稳态水平分析、tRNA氨基酰化分析、Western blot分析、ATP水平检测和线粒体膜电位等实验反映细胞线粒体功能状态.tRNA稳态水平结果显示,经tRNALys、tRNALeu(ULR)、tRNAAla和tRNASer(UCN)标准化后,突变组tRNAMet平均水平分别为对照组平均水平的57.3％(P=0.012)、62.1％(P=0.006)、53.9％(P=0.021)和50.2％(P=0.037);此外,突变组平均tRNA氨基酰化水平为对照组的70％(P=0.023).异常的tRNAMet代谢会导致线粒体tRNA编码的多肽减少,根据Western blot结果,突变样本的MT-C02(以下简称C02)、ATP6和ND3为对照样本的88.20％、57.43％和53.92％,并具有统计学差异.此外,m.4435A＞G突变会造成细胞氧化呼吸链损伤,造成细胞线粒体ATP和膜电位水平的降低.结合ATP水平检测结果,突变组ATP水平平均为对照组的71.5％ (P＜0.001);并且细胞线粒体膜电位水平显示,突变组平均线粒体膜电位水平相比对照组降低38.5％(P＜0.001).m.4435A＞G引起tRNAMe稳态水平降低,tRNAMet氨基酰化水平降低,导致线粒体翻译缺陷,ATP水平降低,膜电位水平降低,这表明,m.4435A＞G突变影响了tRNA的结构和功能,从而改变了线粒体功能.