基于SYBR Green Ⅰ的桑树皱叶病毒qPCR检测方法的建立及应用

• 作者: 卢全有 孙鑫 张健 杨磊
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 桑树皱叶病毒 SYBR Green Ⅰ 实时荧光定量PCR(qPCR) 检测 灵敏度
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 140-145
• 页数: 6页
• 分类号: S888.71|Q939.46|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2020.02.002

摘要

根据桑树皱叶病毒(mulberry crinkle leaf virus,MCLV)cp基因的核苷酸序列,设计了3对用于实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的引物,以含有cp基因全长序列的重组质粒为模板,通过PCR和熔解曲线分析筛选出1对适合用于qPCR的特异性引物.以10倍梯度稀释的含有cp基因全长序列的重组质粒为模板,进行SYBR Green Ⅰ qPCR并制作标准曲线,建立了MCLV的qPCR检测方法.该方法对MCLV cp基因的检测灵敏度≥47.8个拷贝/μL.利用建立的qPCR方法对大田样品进行检测,结果显示15个样品都为MCLV感染阳性,其中病毒含量最高的样品的病毒拷贝数为5.26× 104个拷贝/μL,最低的样品为8.36× 102个拷贝/μL.MCLV qPCR检测体系的建立可以为培育健康桑树种苗、预防病毒病的发生提供精准保障技术,也为研究桑树不同生长时期或不同组织中病毒滴度变化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张健		112	484	12.0	16.0
2	卢全有		8	13	3.0	3.0
3	孙鑫		4	0	0.0	0.0
4	杨磊		8	3	1.0	1.0