水貂阿留申病毒VP2基因TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 周洁 赵丽丽 闫文卓 陆涛峰 陈洪岩
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 水貂阿留申病 水貂阿留申病毒 实时荧光定量PCR VP2 检测方法
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 289-295
• 页数: 7页
• 分类号: Q95-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2020.04.004

摘要

目的 建立一种方便、灵敏的水貂阿留申病-毒(AMDV)荧光定量PCR检测方法,从而实现临床样品中AMDV的快速定量检测.方法 根据AMDV的结构蛋白VP2的基因保守区域设计一对特异性引物和探针,优化PCR反应条件,建立TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,绘制标准曲线,并进行特异性、敏感性和稳定性分析.结果 建立的标准曲线在1.0 ×102拷贝/μL至1.0×108拷贝/μL之间具有良好的线性关系,相关系数(r2)大于0.994.该方法检测的灵敏度为102拷贝/μL,且与犬细小病毒、犬腺病毒、犬瘟热病毒和水貂病毒性肠炎病毒均无明显交叉反应,特异性良好.重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于3％,重复性良好.利用该方法对417份临床组织样品进行检测的结果显示,中国部分地区的AMDV阳性率为81.5％.结论 本研究建立了一种重复性、特异性和敏感性良好的AMDV荧光定量PCR检测方法,可用于AMDV的临床检测和流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周洁		19	51	5.0	6.0
2	闫文卓		1	0	0.0	0.0
3	陆涛峰		1	0	0.0	0.0
4	赵丽丽		1	0	0.0	0.0
5	陈洪岩		1	0	0.0	0.0